Noções básicas de extração de ácido nucleico

Noções básicas de extração de ácido nucleico

A extração de DNA, RNA ou ácidos nucleicos totais de amostras como sangue, células cultivadas, micróbios ou tecidos vegetais e animais é crítica para o sucesso de muitos experimentos.A pureza e o rendimento dos ácidos nucleicos extraídos são fundamentais para o desempenho em aplicações posteriores, como PCR e sequenciamento.

Durante a purificação, todas as amostras progridem através de um conjunto comum de manipulações: lise celular, limpeza, inativação de nucleases, ligação de ácido nucleico, lavagem e eluição.

A otimização das metodologias de extração é fundamental para o sucesso, especialmente com tipos de amostras desafiadores e aplicações downstream exigentes.O ácido nucleico alvo deve ser purificado sem contaminantes, incluindo proteínas, outros componentes celulares e ácidos nucleicos indesejados.

A maioria dos métodos de extração de DNA purifica o DNA de outros materiais celulares, ligando o DNA a um suporte sólido, como sílica ou celulose, purificando o DNA extraído de contaminantes por lavagem e, em seguida, eluindo o DNA purificado em água ou tampão.