Um fator importante na espectrofotometria é a absorção de luz, que permite uma fácil análise qualitativa e quantitativa.
Assim, na realização da espectrofotometria, é necessário o uso de um espectrofotômetro, pois ele é construído com um espectrômetro e um fotômetro.Outros componentes de um espectrofotômetro incluem uma fonte de luz (monocromador), uma cubeta e um detector de luz e software de análise de dados.
Aplicação do Espectrofotômetro
-Química
-bioquímica (para reações catalisadas por enzimas)
-Física
- Biologia
-estudos clínicos
O teste da qualidade da água foi facilitado por meio de um espectrofotômetro.Quão segura é a água para beber, quão pura e límpida ela é, quais propriedades ela contém, etc. Tudo isso pode ser testado de forma rápida e barata através de um espectrofotômetro.
Antes de os medicamentos serem liberados para uso na sociedade, eles precisam passar por alguns testes rigorosos para garantir que funcionam para o propósito para o qual foram criados.Um espectrofotômetro provou ser uma maneira econômica e econômica de fazer isso.
Tipos de espectrofotômetro
Existem dois tipos principais de espectrofotômetro, nomeadamente o espectrofotômetro de feixe único e o espectrofotômetro de feixe duplo.Esses dois espectrofotômetros podem realizar diferentes tipos de análises e não possuem as mesmas especificações.
O espectrofotômetro de feixe único
O espectrofotômetro de feixe único é projetado para fornecer luz através de uma amostra, fornecendo um feixe.Este espectrofotômetro foi projetado para análises mais detalhadas e é preferido para fornecer uma taxa dinâmica mais alta.Seu design também é compacto, o que significa que podem ser facilmente movimentados.
O espectrofotômetro de feixe duplo
Este tipo de espectrofotômetro é projetado pensando na precisão, pois pode liberar feixes duplos, que desempenhariam funções especiais para ajudar a chegar a um relatório mais definido e preciso.Portanto, neste caso, sua automação é mais fluida devido à sua dupla configuração processual.
Mais tipos:
Espectrofotômetro de fluorescência
-Espectrofotômetro de absorção atômica.
-Micro Espectrofotômetro
-Espectrofotômetro Visível
-Espectrofotômetro UV-VIS
Nível de absorção e transmitância
O usuário pode controlar a temperatura de um banho-maria de laboratório de sorologia usando uma interface digital ou analógica.Geralmente, uma luz indica que o banho-maria está funcionando e, assim que a temperatura correta for atingida, o banho-maria será ligado e desligado para manter a temperatura constante.Certos banhos-maria de laboratório possuem uma configuração de segurança que evita que a água aqueça a uma temperatura mais elevada.
Também existem diferentes tipos de banhos-maria de laboratório, por exemplo, banhos-maria com agitação, que são usados para misturar substâncias e possuem controles adicionais que permitem aos usuários controlar a velocidade e a frequência dos movimentos.Os banhos-maria de laboratório não precisam conter água e podem utilizar fluidos alternativos, como óleo, dependendo da temperatura e viscosidade exigidas. Ao realizar seu processo, o espectrofotômetro precisa conhecer o nível de absorbância e transmitância da solução.Assim, quando a luz passa, o nível de absorção e transmitância determinaria o processo que o cientista precisaria realizar para tornar sua análise precisa.Então é por isso que uma cubeta é usada como recipiente de amostra, para saber quão bem ela absorveria a luz.
No entanto, a transmitância do processo precisa ser calculada usando a seguinte equação:
Transmitância (T) = It/I0
It = Intensidade da luz após passar pela cubeta (luz transmitida)
I0 = Intensidade da luz antes de passar pela cubeta (luz incidente)
Absorvância (A) = – log10 T = – log IS/IR
Além disso, a Absorbância pode ser medida com esta equação, combinando a Lei de Beer-Lambert e o Espectrofotômetro: A = ƐCL.
A = absorbância da luz em um comprimento de onda específico
Ɛ = coeficiente de extinção molar (absorvância de 1 mol de uma substância dissolvida em 1 litro de solvente)
C = a concentração molar de uma amostra
L = o comprimento do caminho óptico de uma amostra.
Medindo a absorção com um espectrofotômetro
Para fazer isso, é necessário obter mais informações sobre o valor do coeficiente de extinção molar, comprimento do caminho óptico e concentração molar.
Coeficiente de Extinção Molar – Ɛ é o valor no qual a luz em um determinado comprimento de onda se acentua com a solução química.
A unidade SI é m2/mol, mas às vezes é expressa como M-1 cm-1 ou L mol-1 cm-1.O coeficiente de extinção molar também pode ser derivado de fontes bibliográficas em bibliotecas e online.
